摘要目的觀察不同劑量的中藥紅花萃取物（HE）對(duì)腎性高血壓大鼠血液抗性炎性細(xì)胞因子白介素-10（IL-10）的水平的影響。方法選取2月齡健康Wistar大鼠隨機(jī)分為五組：假手術(shù)組（A組）、模型對(duì)照組（B組）、紅花高劑量組（C組）、紅花中劑量組（D組）和紅花低劑量組（E組），采用改良的兩腎一扎方法建立大鼠高血壓模型。分組灌胃給藥五周后，稱重處死動(dòng)物，抽取血液，分離血清,﹣70℃保存?zhèn)溆茫�采用ELISA法測(cè)定血清IL-10的濃度。結(jié)果各組大鼠血清IL-10的濃度分別為101.29±7.59pg/ml(A)，95.91±5.69pg/ml(B)，95.31±6.22pg/ml(C)，95.49±5.53pg/ml(D)和95.55±5.22pg/ml(E)，各組之間統(tǒng)計(jì)學(xué)處理均無(wú)明顯差異（p>0.05）；結(jié)論腎性高血壓大鼠血清抗炎性細(xì)胞因子IL-10水平變化不大，中藥紅花萃取物無(wú)明顯升高抗炎性細(xì)胞因子IL-10的作用。
　　關(guān)鍵詞：高血壓；腎性；大鼠；IL-10；紅花萃取物；
　　高血壓病是臨床最常見(jiàn)的疾病之一，亦是動(dòng)脈粥樣硬化、冠心病、腦血管疾病以及其他許多血管性疾病發(fā)生的最危險(xiǎn)因素，近年來(lái)的研究表明炎性機(jī)制在高血壓的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)歸中也扮演著極其重要的角色，特別是促炎性細(xì)胞因子與高血壓的發(fā)生、發(fā)展存在密切的聯(lián)系，促炎性細(xì)胞因子如腫瘤壞死因子（TNF-α）、白介素-6（IL-6）等不僅可引發(fā)高血壓和導(dǎo)致高血壓病人的胰島素抵抗［1］，而且與高血壓的其他并發(fā)癥如動(dòng)脈硬化、心室肥厚、心功能減退以及血栓形成等的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)［2］，而IL-10被認(rèn)為是體內(nèi)最重要的抗炎細(xì)胞因子，對(duì)炎癥反應(yīng)的調(diào)控起非常重要的作用，既往的研究表明，而中藥紅花不僅具有降壓作用［3］，并有改善循環(huán)、抗血小板聚集、降低促炎性細(xì)胞因子水平等多種功能［4,5］，但其對(duì)抗炎性細(xì)胞因子IL-10的影響鮮有報(bào)道，本研究采用動(dòng)物模型，觀察了紅花萃取物對(duì)腎性高血壓大鼠血液中的抗炎性細(xì)胞因子IL-10水平的影響，現(xiàn)報(bào)告如下。
　　1.實(shí)驗(yàn)材料與方法
　　1.1材料與試劑
　　2月齡健康Wistar大鼠50只,♀♂兼用，體重160-180g,由煙臺(tái)綠葉制藥有限公司動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室提供，普通飲食喂養(yǎng)。紅花萃取物由煙臺(tái)綠葉制藥有限公司提供；IL-10ELISA法檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝）購(gòu)自北京邦定泰克生物技術(shù)有限公司。
　　1.2.方法
　　1.2.1腎性高血壓模型建立取健康Wistar大鼠,術(shù)前禁食12h,自由飲水,測(cè)尾動(dòng)脈壓,用3%戊巴比妥鈉(0.23ml/100g)行腹腔注射麻醉后,腹左側(cè)備皮,于左肋弓下緣0.5cm、脊柱前0.5cm處行1.5～2.0cm縱切口,逐層分離皮下組織,于左腎后上方用自制的玻璃分針?lè)蛛x腎動(dòng)脈,在左右腎動(dòng)脈分支之間的腹主動(dòng)脈下穿入2.0手術(shù)縫線,沿血管走行方向放置7號(hào)注射針頭與腹主動(dòng)脈一起結(jié)扎,然后小心拔出針頭,腹腔滴入青霉素(40萬(wàn)U/ml)適量,逐層關(guān)腹、縫合，術(shù)后肌注青霉素10萬(wàn)U。假手術(shù)組不結(jié)扎腹主動(dòng)脈,其余同手術(shù)組。術(shù)后正常飲食,定時(shí)觀察體征。
　　1.2.2分組、給藥與取材將50只大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組（A組）10只，手術(shù)組40只，再將手術(shù)組大鼠隨機(jī)分為四組：模型對(duì)照組（B組），紅花高劑量組（C組）及紅花中劑量組（D組），以及紅花低劑量組（E組）各10只，五組大鼠按上述方法造模二周后，C組、D組及E組大鼠分別予以紅花萃取物80mg/kg、40mg/kg、20mg/kg灌胃，每日一次，而A組和B組大鼠予以等量飲用水，給藥總時(shí)程為五周。給藥結(jié)束后，處死動(dòng)物，腹主動(dòng)脈取血，高速離心后分離血清，零下70℃保存?zhèn)溆谩?br /> 　　2.檢測(cè)方法與統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
　　采用ELISA法測(cè)定血清IL-10的濃度，各項(xiàng)指標(biāo)均用±S表示,兩組間比較用ｔ檢驗(yàn)，所有數(shù)據(jù)均輸入SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，p<0.05為統(tǒng)計(jì)學(xué)差別有顯著性意義。
　　3.結(jié)果
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，各組大鼠血清IL-10濃度變化的情況（見(jiàn)表1）。
　　表1卡托普利及紅花萃取物對(duì)大鼠血清IL-6、IL-10及TNF-α濃度的影響（±S）
　　
　　注：△與假手術(shù)組相比，p>0.05;﹡與模型對(duì)照組相比，p>0.05;
　　結(jié)果顯示，各組之間相互比較，IL-10的血清濃度變化不大，統(tǒng)計(jì)學(xué)差異無(wú)顯著性。
　　4.討論
　　IL-10是最初是由Fiorentino在1989年發(fā)現(xiàn)的鼠輔助T細(xì)胞Th2亞型細(xì)胞分泌的一種細(xì)胞因子，能抑制巨噬細(xì)胞活化及繼發(fā)的細(xì)胞免疫反應(yīng),對(duì)單核/巨噬細(xì)胞的細(xì)胞因子的合成和功能有廣泛的抑制作用,具有抑制單核/巨噬細(xì)胞產(chǎn)生TNF-α、IL-6、白介素-1α（IL-1α）、白介素-1β（IL-1β）等促炎性細(xì)胞因子、抑制核因子-κB（NF-κB）和Ras等信號(hào)傳導(dǎo)通路、上調(diào)體內(nèi)細(xì)胞因子拮抗劑IL-1RA等多種作用［6］。體外研究表明，抗炎性細(xì)胞因子IL-10具有對(duì)抗促炎性細(xì)胞因子、抗細(xì)胞凋亡以及抗平滑肌細(xì)胞增殖等有利于高血壓治療的作用［7］，提高其循環(huán)中的濃度也是高血壓抗炎干預(yù)的一個(gè)靶點(diǎn)，張永和等人在多發(fā)性創(chuàng)傷的研究中顯示IL-10的循環(huán)水平于損傷后第1天開(kāi)始升高,至第5天達(dá)到高峰,2周后仍高于正常對(duì)照組，其水平升高程度與促炎性細(xì)胞因子TNF-α、IL-6的水平呈正相關(guān)，監(jiān)測(cè)其變化有利于創(chuàng)傷程度的判斷具有顯著的臨床意義［8］。本研究顯示在腎性高血壓大鼠循環(huán)中IL-10的水平變化不大，其機(jī)制有待于進(jìn)一步研究，可能與觀察時(shí)間長(zhǎng)（七周）有關(guān)。
　　紅花為傳統(tǒng)的中藥之一，具有良好的活血通經(jīng)、化瘀止痛的功能，其萃取物的主要水溶性成分為紅花黃色素，是多種查耳酮類化合物的混合物，具有擴(kuò)張血管、降低血壓、改善血粘度、抗血小板聚集等多種功能［9］。細(xì)胞凋亡是高血壓左室重構(gòu)的重要機(jī)制之一，有研究顯示其能夠顯著降低BAX、提高Bcl-2在心肌組織內(nèi)的表達(dá)，可防止心肌細(xì)胞的凋亡，并可明顯降低循環(huán)中的促炎性細(xì)胞因子TNF-α、IL-6的濃度［10］，這些特性對(duì)預(yù)防及延緩高血壓的并發(fā)癥的發(fā)生發(fā)展具有重要的作用，盡管IL-10是體內(nèi)最重要的抗炎細(xì)胞因子，本研究顯示在腎性高血壓時(shí)，不同劑量的紅花萃取物對(duì)IL-10循環(huán)的水平均無(wú)明顯影響，顯示了紅花提取物可能主要是通過(guò)抑制促炎性機(jī)制的活性而在高血壓的治療中發(fā)揮重要的作用。
　　5.參考文獻(xiàn)
　　1．尤巧英.部分炎癥因子與胰島素抵抗［J］.國(guó)外醫(yī)學(xué)內(nèi)分泌學(xué)分冊(cè)，2004,24(3):183-186。
　　2．余琴，李新，趙翠花.原發(fā)性高血壓病患者細(xì)胞因子水平與左心功能的相關(guān)分析［J］.中國(guó)心血管病研究雜志，2004，2(3):187-189。
　　3．楊蕾，張志云，李云鵬等．紅花提取物對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠血壓影響的實(shí)驗(yàn)研究［J］.河北中醫(yī)藥學(xué)報(bào)，2004，19(3)：26-29。
　　4．樸永哲，金鳴．紅花抗心肌缺血研究進(jìn)展［J］.中草藥，2001，32（5）：473-475。
　　5．劉素云,張輝,李擁軍等.紅花注射液對(duì)冠心病介入治療中缺血心肌保護(hù)作用及機(jī)制［J］.河北中醫(yī)藥學(xué)報(bào),2004,19(3):29-31。
　　6．呂欣，李泉，俞衛(wèi)鋒.IL-10與全身炎癥反應(yīng)綜合征［J］.國(guó)外醫(yī)學(xué).麻醉學(xué)與復(fù)蘇分冊(cè)，2002，23(4):224-227。
　　7．歐陽(yáng)平，楊紅，彭立勝等.白介素-10對(duì)TNF-α介導(dǎo)血管平滑肌細(xì)胞增殖的影響［J］.中山大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2002，41(1):76-78。
　　8．張永河，趙寧，宋祖軍．多發(fā)性創(chuàng)傷后血清TNF-α、IL-1β、IL-6及IL-10變化的連續(xù)觀察［J］.中國(guó)急救醫(yī)學(xué)2002，22（3）：143-144。
　　9.楊志福，梅其炳，蔣永培.紅花有效成分及藥理作用［J］.西北藥學(xué)雜志，2001，16（3）：131-133。
　　10.明章銀,蔣建剛,劉復(fù)興等．紅花注射液對(duì)大鼠缺血再灌注心肌組織Bcl-2和Bax基因表達(dá)的影響［J］.咸寧醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2002，16（2）：81-84。