中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào)最新期刊目錄

基于正交試驗(yàn)的Pochonia chlamydosporia原生質(zhì)體電轉(zhuǎn)化體系優(yōu)化及生物學(xué)功能分析————作者：郝陸瑤;劉泓佑;趙逢淼;馬園;馬成宇;李政憶;王瑞;

摘要：該本研究旨在構(gòu)建高效的厚垣普可尼亞菌（Pochonia chlamydosporia）原生質(zhì)體遺傳轉(zhuǎn)化體系，以促進(jìn)基因轉(zhuǎn)化和遺傳改造及后續(xù)的生物學(xué)功能研究。通過正交試驗(yàn)，本研究系統(tǒng)優(yōu)化了電轉(zhuǎn)化過程中電壓、穩(wěn)滲劑、電脈沖時(shí)間、核酸質(zhì)量濃度和原生質(zhì)體濃度等關(guān)鍵因素。結(jié)果顯示，最佳的電轉(zhuǎn)化條件為：電壓250 V、穩(wěn)滲劑為0.6 mol/L蔗糖溶液、電脈沖時(shí)間10 ms、質(zhì)粒濃度1%、原生質(zhì)體濃度1 × ...

驢源馬鏈球菌馬亞種sagA和aroA雙基因缺失菌株的構(gòu)建及其生物學(xué)特性分析————作者：劉冰;劉廣源;高楠楠;丁召亮;于杰;魏傳祿;李海靜;王華;董世山;董建寶;

摘要：馬腺疫是規(guī)模化養(yǎng)驢場(chǎng)最主要的高發(fā)疫病之一，嚴(yán)重影響著我國(guó)驢產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展，疫苗接種是該病防制的有效途徑，而我國(guó)目前尚沒有該病的驢源菌株弱毒疫苗。本研究旨在為馬腺疫弱毒疫苗的研發(fā)提供侯選菌株。本研究以驢源馬鏈球菌馬亞種野毒株為研究對(duì)象，利用同源重組基因敲除技術(shù)，將編碼5-烯醇丙酮酰莽草酸-3-磷酸合成酶的aroA基因以及編碼鏈球菌溶血素S毒素原的sagA基因進(jìn)行人工敲除，獲得雙基因缺失菌株并對(duì)其毒力...

實(shí)時(shí)熒光LAMP法快速檢測(cè)轉(zhuǎn)基因豬的外源基因hCD46————作者：張真;李津;苗健;劉巍;李剛;李華斌;李春和;溫麗娟;趙瑞利;范君文;趙忠鵬;

摘要：為了建立快速、簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確的檢測(cè)轉(zhuǎn)基因豬外源外源基因的方法。試驗(yàn)采用了實(shí)時(shí)熒光LAMP法的檢測(cè)轉(zhuǎn)基因豬的外源基因。針對(duì)hCD46基因設(shè)計(jì)6條特異性引物，在63℃條件下，檢測(cè)時(shí)間在45 min以內(nèi)完成核酸擴(kuò)增。通過實(shí)時(shí)熒光監(jiān)測(cè)儀監(jiān)測(cè)LAMP擴(kuò)增中SYBR Green I染料在紫外熒光下激發(fā)的熒光信號(hào)強(qiáng)度，作為hCD46基因擴(kuò)增的判定依據(jù)。結(jié)果表明：構(gòu)建的方法靈敏度高，最小可檢測(cè)低至4.4×10

金銀花提取物調(diào)控PI3K/AKT/mTOR通路抑制犬乳腺腫瘤細(xì)胞活性及機(jī)制研究————作者：孫真真;張玉珠;趙藝?guó)?謝光洪;鄭慧華;

摘要：旨在探討金銀花提取物對(duì)犬乳腺腫瘤細(xì)胞的抗腫瘤活性及其潛在機(jī)制，本研究首先通過CCK-8法評(píng)估其對(duì)正常細(xì)胞（犬乳腺上皮細(xì)胞PETCC3059、小鼠乳腺上皮細(xì)胞EpH4-Ev）及腫瘤細(xì)胞（CHMm、CHMp）的毒性差異。結(jié)果顯示，正常細(xì)胞在0～20 g/L質(zhì)量濃度下未表現(xiàn)毒性，PETCC3059和EpH4-Ev分別在40、60 g/L時(shí)活性受抑；而腫瘤細(xì)胞CHMm和CHMp在5、2.5 g/L時(shí)即出現(xiàn)...

斯氏艾美耳球蟲ASP重組腺相關(guān)病毒的制備及體外活性檢測(cè)————作者：李亞歡;李超凡;陳夢(mèng)閣;李新;王曉岑;張旭;宮鵬濤;張楠;李建華;

摘要：制備可表達(dá)斯氏艾美耳球蟲天冬氨酸蛋白酶的重組腺相關(guān)病毒（rAAV9-ZsGreen1-EsASP），并探究其體外活性。通過PCR擴(kuò)增EsASP基因，利用同源重組法將重組腺相關(guān)病毒載體pAAV-IRES-ZsGreen1與EsASP基因相結(jié)合，構(gòu)建pAAV-ZsGreen1-EsASP表達(dá)質(zhì)粒；采用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法將pAAV-ZsGreen1-EsASP表達(dá)質(zhì)粒、pHelper和pAAV-RC9質(zhì)粒共轉(zhuǎn)...

DNA損傷應(yīng)答調(diào)控新城疫病毒復(fù)制的研究————作者：董傳榮;金海林;劉新鑫;閆巍文;李虹瑾;尹仁福;

摘要：新城疫（Newcastle disease， ND）是由新城疫病毒（Newcastle disease virus， NDV）引發(fā)的一種高度傳染性烈性禽病，持續(xù)威脅全球家禽養(yǎng)殖業(yè)。盡管目前已廣泛實(shí)施疫苗接種，但散發(fā)疫情依然頻發(fā)，提示其致病機(jī)制尚未被完全闡明，需探索新的防控靶點(diǎn)。DNA損傷應(yīng)答（DNA damage response， DDR）是宿主維持基因組穩(wěn)定的重要機(jī)制，近年來被發(fā)現(xiàn)與病毒感染密...

檢測(cè)豬瘟病毒E^rns蛋白抗體的雙抗原夾心化學(xué)發(fā)光方法的建立————作者：楊梓涵;劉鐘迪;張藝瀟;左青山;宋啟超;王遵寶;郭藝迪;涂長(zhǎng)春;龔文杰;

摘要：為建立一種特異性強(qiáng)、靈敏度高、操作高效便捷的檢測(cè)豬瘟病毒（classical swine fever virus， CSFV）E^rns蛋白抗體的方法，以便鑒別E2亞單位疫苗免疫和流行毒株感染的抗體。本研究將昆蟲桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)純化的E^rns蛋白，分別與偶聯(lián)于固相載體-羧基磁珠和辣根過氧化物酶（horseradish peroxidase， HRP），...

非洲豬瘟病毒p37重組蛋白對(duì)小鼠免疫原性分析————作者：黃穎;翟文竹;陶春豪;何宇恒;王振;儲(chǔ)媛媛;龐忠寶;朱鴻飛;賈紅;

摘要：旨在探究非洲豬瘟病毒（African swine fever virus, ASFV）p37重組蛋白對(duì)小鼠的免疫原性。使用p37重組蛋白作為抗原，腹部皮下免疫C57BL/6J小鼠。首免后21 d進(jìn)行二免，ELISA檢測(cè)血清特異性抗體水平；采用多因子技術(shù)檢測(cè)血清中細(xì)胞因子水平；二免7 d分離小鼠脾淋巴細(xì)胞，通過ELISpot檢測(cè)p37重組蛋白刺激后分泌IFN-γ的脾淋巴細(xì)胞數(shù)量，并用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)C...

豬繁殖與呼吸綜合征病毒環(huán)狀RNA疫苗的構(gòu)建及環(huán)化條件優(yōu)化————作者：陶春豪;黃穎;王振;姜一曈;朱鴻飛;賈紅;

摘要：為構(gòu)建一種環(huán)化率高、便捷有效的環(huán)狀RNA(circRNA)疫苗制備體系，本研究采用基于Ⅰ型內(nèi)含子的內(nèi)含子外顯子置換(permuted intron exon, PIE)策略，構(gòu)建了綠色熒光蛋白(EGFP) circRNA,并對(duì)體外轉(zhuǎn)錄后(IVT)、一次環(huán)化后(IVC1)、二次環(huán)化后(IVC2)的RNA進(jìn)行了circRNA環(huán)化率的比較，在對(duì)circRNA進(jìn)行純化后將構(gòu)建的circRNA體系應(yīng)用于豬繁...

豬流行性腹瀉病毒纖突蛋白抗原表位的表達(dá)及其納米抗體的篩選————作者：胡湘云;陳少梅;宣澤義;羅蒙和;潘銳;楊楷;奚玉蓮;曹艷紅;

摘要：為制備豬流行性腹瀉病毒(PEDV)纖突蛋白(S)抗原表位的納米抗體，并驗(yàn)證其反應(yīng)活性。本研究采用人工合成PEDV S蛋白抗原表位區(qū)域SN,通過原核表達(dá)系統(tǒng)構(gòu)建表達(dá)載體pCZN1-SN,對(duì)SN片段進(jìn)行原核表達(dá)，經(jīng)Ni-NTA層析柱進(jìn)行純化，利用噬菌體展示技術(shù)從天然納米抗體文庫(kù)中靶向篩選SN納米抗體，經(jīng)過3輪親和篩選，獲得陽(yáng)性克隆并測(cè)序，選取反應(yīng)活性最強(qiáng)的1株克隆進(jìn)行原核表達(dá)，經(jīng)Western blo...

TPCK胰酶對(duì)豬流行性腹瀉病毒在Vero細(xì)胞上增殖的影響————作者：張大妹;楊柳;高廣亮;李紹梅;羅杰;付利芝;余遠(yuǎn)迪;許國(guó)洋;

摘要：旨在探究甲苯磺酰基-L-氨基聯(lián)苯氯甲基酮（TPCK）胰酶對(duì)豬流行性腹瀉病毒（PEDV）在Vero細(xì)胞上增殖規(guī)律的影響。試驗(yàn)通過在病毒增殖過程添加TPCK胰酶和常規(guī)胰酶，利用RT-qPCR技術(shù)，分析病毒吸附和入侵Vero細(xì)胞的變化規(guī)律，并通過生長(zhǎng)曲線繪制、IFA鑒定和細(xì)胞活性檢測(cè)，解析PEDV在Vero細(xì)胞上的復(fù)制能力變化。結(jié)果顯示，TPCK胰酶和常規(guī)胰酶最適質(zhì)量濃度分別為1、6 mg/L;PEDV...

2022-2023年河南省豬圓環(huán)病毒2型流行病學(xué)調(diào)查及其在豬場(chǎng)內(nèi)的分布————作者：李振坤;袁晉;路浩;邢金超;李陽(yáng);董芳婷;徐盟龍;張?jiān)?魏戰(zhàn)勇;

摘要：為了解2022-2023年河南省豬圓環(huán)病毒2型(porcine circovirus type 2, PCV2)的流行變異及其在豬場(chǎng)內(nèi)部的分布情況，本研究使用熒光定量PCR方法對(duì)河南省18個(gè)市區(qū)規(guī)模化豬場(chǎng)的1 206份豬血液樣品和2個(gè)PCV2陽(yáng)性豬場(chǎng)共318份豬只及環(huán)境樣品進(jìn)行了PCV2檢測(cè)，并對(duì)陽(yáng)性樣品進(jìn)行ORF2基因測(cè)序和遺傳進(jìn)化分析。結(jié)果顯示，河南省PCV2陽(yáng)性率為7.05%(85/1 20...

豬源致病性大腸桿菌分離鑒定及毒力基因檢測(cè)和耐藥性分析————作者：劉碩琦;劉瑩;孟子薇;張靜雯;范京惠;左玉柱;

摘要：為了解河北省部分地區(qū)豬源大腸桿菌的致病性、耐藥性及其生物學(xué)特性，本研究從豬場(chǎng)采集的仔豬腹瀉糞便進(jìn)行大腸桿菌分離鑒定，并對(duì)分離菌株進(jìn)行藥敏試驗(yàn)、生物被膜形成能力檢測(cè)、致病性試驗(yàn)、毒力基因檢測(cè)、耐藥基因檢測(cè)以及系統(tǒng)進(jìn)化分群鑒定。結(jié)果顯示，從腹瀉仔豬糞便中共分離到35株致病性大腸桿菌，其中多數(shù)為多重耐藥菌，至少對(duì)3種抗生素耐藥。分離菌對(duì)阿莫西林（88.57%）、氨芐西林（88.57%）、強(qiáng)力霉素（88....

不同來源雞源大腸桿菌的分離鑒定、分子分型及耐藥性致病性分析————作者：王佳宇;郝小靜;孫美玲;劉文華;

摘要：為了解大腸桿菌在不同種群雞的感染狀況，本試驗(yàn)對(duì)煙臺(tái)地區(qū)3個(gè)孵化場(chǎng)的1日齡雛雞、死胚和9個(gè)肉雞養(yǎng)殖場(chǎng)的臨床病死雞以及淘汰種雞的1 950份樣品進(jìn)行了大腸桿菌的分離鑒定；通過脈沖場(chǎng)凝膠電泳對(duì)分離菌株進(jìn)行同源性分析；應(yīng)用PCR進(jìn)行毒力基因和血清型鑒定；通過接種雞胚確定致病性；通過藥敏試驗(yàn)確定菌株耐藥性。結(jié)果顯示，共分離出116株大腸桿菌，其中成功分型的97株劃分為66個(gè)帶型；經(jīng)PCR檢測(cè)出15種毒力基因...

1株多源曼氏桿菌TbpB定點(diǎn)突變與免疫原性————作者：閆智豪;朱玉紅;時(shí)間;馬興懌;甘玲;郭建華;

摘要：多源曼氏桿菌（Mannheimia varigena,M.varigena）是引起牛呼吸道疾病的重要病原體。轉(zhuǎn)鐵結(jié)合蛋白B（transferrin binding protein B,TbpB）是一種直接暴露于細(xì)胞外膜的脂蛋白，不僅參與細(xì)菌鐵離子代謝，還是一種重要的毒力因子。為探究M.varigena的TbpB與牛轉(zhuǎn)鐵蛋白（bovine transferrin, bTf）結(jié)合關(guān)鍵氨基酸殘基突變對(duì)其...

牛多殺性巴氏桿菌交叉免疫保護(hù)性抗原蛋白PmCQ2-5175的篩選及效果評(píng)價(jià)————作者：熊盼;黃艷瀾;劉思渝;楊柳;趙光夫;李能章;何芳;彭遠(yuǎn)義;

摘要：A型多殺性巴氏桿菌(Pasteurella multocida,Pm)是引起牛肺炎等呼吸系統(tǒng)疾病的重要病原菌，嚴(yán)重制約我國(guó)養(yǎng)牛業(yè)的健康發(fā)展。目前，主要通過疫苗接種預(yù)防該病，但由于Pm血清型眾多，導(dǎo)致疫苗交叉免疫保護(hù)作用較差。因此，研發(fā)具有交叉保護(hù)作用的疫苗對(duì)防控Pm感染具有重要意義。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn)，PmCQ2Δcra對(duì)A、B、F等不同莢膜血清型菌株(PmA、PmB、PmF)均具有良好的免疫保...

中國(guó)山羊源睡眠嗜組織菌(Histophilus somni)的分離鑒定及致病性————作者：李富祥;高華峰;趙文華;

摘要：旨在對(duì)云南省1起山羊呼吸道疾病進(jìn)行細(xì)菌病原鑒定，從患病山羊的肺臟樣品中分離到3株革蘭陰性小球桿菌（YN240861、YN240862和YN240863）,并對(duì)其進(jìn)行了生化鑒定、16S rDNA基因序列相似性與遺傳進(jìn)化分析、致病性試驗(yàn)以及藥物敏感性檢測(cè)。鑒定結(jié)果顯示，3株分離株的生化特征與睡眠嗜組織菌（Histophilus somni,Hi.somni）模式菌株ATCC 43625^T

長(zhǎng)沙地區(qū)養(yǎng)殖場(chǎng)利奈唑胺耐藥腸球菌的流行及基因組特征————作者：劉建勤;張建超;陳智;楊輝;朱紅剛;漆亮;陳小軍;

摘要：為了解湖南省長(zhǎng)沙地區(qū)養(yǎng)殖場(chǎng)腸球菌的耐藥情況，采集豬、牛、雞和鵪鶉的肛拭子、糞便及環(huán)境樣本共596份，進(jìn)行腸球菌分離和質(zhì)譜鑒定。采用瓊脂擴(kuò)散法測(cè)定菌株對(duì)10種抗菌藥物的最小抑菌濃度(MIC),并通過全基因組測(cè)序(WGS)分析多位點(diǎn)序列分型(ST)、耐藥基因及毒力基因的分布情況。結(jié)果顯示，共分離出272株腸球菌，分離率為45.6%。分離菌株對(duì)頭孢西丁和頭孢噻呋耐藥率最高(68.9%和58.5%),其次...

雞毒支原體與雞滑液囊支原體雙重TaqMan熒光定量PCR方法的建立與應(yīng)用————作者：董志民;王利麗;田向?qū)W;路超;張莉;鄢明華;

摘要：為快速檢測(cè)與鑒別雞毒支原體(Mycoplasma gallisepticum,MG)和雞滑液囊支原體(Mycoplasma synoviae,MS),本研究根據(jù)NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)中2種病原的16S rRNA基因序列的保守區(qū)，分別設(shè)計(jì)引物和TaqMan探針，通過優(yōu)化反應(yīng)條件，建立了一種可同時(shí)檢測(cè)MG和MS的雙重TaqMan熒光定量PCR方法，并對(duì)其特異性、敏感性、重復(fù)性和可靠性進(jìn)行了驗(yàn)證。結(jié)果顯示，該方...

腦心肌炎病毒樣顆粒疫苗的制備及免疫保護(hù)效果評(píng)價(jià)————作者：張艷芳;朱瓊;付杰;方耀輝;靳佳音;張丹娜;鄧菲;曹勝波;

摘要：腦心肌炎是由腦心肌炎病毒(encephalomyocarditis virus, EMCV)引起的一種以腦炎、心肌炎為主要臨床特征的人畜共患傳染病。為探索有效的預(yù)防措施，本研究利用桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)，將EMCV的P12A和3C基因插入到pFastBacDual穿梭載體中，構(gòu)建重組桿狀病毒Ac-P12A-3C,并大量表達(dá)和純化了EMCV病毒樣顆粒(EMCV-VLPs),透射電鏡觀察顯示，EM...

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